به گزارش پایگاه خبری دانا انجمن علمی دانشجویی بیوشیمی بالینی دانشگاه علوم پزشکی تهران برگزار می کند:
کارگاه عملی وسترن بلاتینگ
وسترن بلاتینگ (Western Blotting) یک تکنیک آزمایشگاهی است که برای شناسایی و اندازهگیری پروتئینها در نمونههای بیولوژیکی استفاده میشود. این روش به طور خاص برای شناسایی پروتئینهای خاص در میان مجموعهای از پروتئینها به کار میرود و معمولاً در تحقیقات بیوشیمی و زیستشناسی مولکولی استفاده میشود.
مراحل اصلی وسترن بلاتینگ:
جداسازی پروتئینها: در ابتدا، نمونههای پروتئینی (مانند بافت یا سلول) با استفاده از الکتروفورز ژل (معمولاً SDS-PAGE) جداسازی میشوند. این فرایند به جداسازی پروتئینها بر اساس اندازه و بار الکتریکی آنها کمک میکند.
انتقال پروتئینها: پس از جداسازی، پروتئینها به یک غشای نازک (معمولاً نیتروسلولز یا PVDF) منتقل میشوند. این مرحله به نام "بلاتینگ" شناخته میشود.
انسداد: غشا با استفاده از محلولهای انسدادی (مانند شیر خشک یا BSA) پوشانده میشود تا از اتصال غیر اختصاصی آنتیبادیها به غشا جلوگیری شود.
شناسایی پروتئین هدف: غشا با آنتیبادیهای خاصی که به پروتئین هدف متصل میشوند، Incubate میشود. این آنتیبادیها معمولاً از نوع اولیه هستند و به پروتئین خاصی که مورد نظر است، متصل میشوند.
شستشو: بعد از مرحله اتصال، غشا با محلولهای شستشو تمیز میشود تا آنتیبادیهای غیر اختصاصی حذف شوند.
استفاده از آنتیبادی ثانویه: یک آنتیبادی ثانویه که به آنتیبادی اولیه متصل میشود، اضافه میشود. این آنتیبادی معمولاً به یک آنزیم یا فلوروفور متصل است که امکان شناسایی و اندازهگیری پروتئین را فراهم میکند.
تشخیص: در نهایت، با استفاده از روشهای مختلف (مانند رنگآمیزی، لومینسنس یا فلورسانس)، پروتئینهای شناسایی شده قابل مشاهده و تجزیه و تحلیل میشوند.
کاربردها:
شناسایی و اندازهگیری پروتئینهای خاص در تحقیقات بیوشیمی.
تشخیص بیماریها، به ویژه در زمینههای ایمونولوژی و سرطان.
مطالعه تغییرات پروتئینی در شرایط مختلف.
وسترن بلاتینگ ابزاری قدرتمند و مؤثر در زیستشناسی مولکولی و بیوشیمی است که به محققان کمک میکند تا اطلاعات دقیقی درباره پروتئینها به دست آورند.
مدرس: سرکار خانم دکتر قربانگل اصحابی (هیات علمی دانشگاه علوم پزشکی تهران)
تاریخ برگزاری: ۲۹ بهمن ۱۴۰۳
ساعت: ۸:۳۰ الی ۱۸
مکان برگزاری: دانشگاه علوم پزشکی تهران
ارائه گواهی معتبر
جهت ثبت نام به آیدی زیر مراجعه فرمایید
@CBSSAT