کارگاه آنلاین ارزیابی سمیت سلولی با استفاده از روش MTT

به گزارش پایگاه خبری دانا  مجموعه علمی وینسل با همکاری انجمن زیست‌شناسی سلولی و مولکولی دانشگاه خوارزمی و مرکز تحقیقات سلول های بنیادی برگزار می‌کند: 

کارگاه آنلاین ارزیابی سمیت سلولی با استفاده از روش MTT
روش MTT یکی از تکنیک‌های رایج برای ارزیابی سمیت سلولی و تعیین زنده‌مانی سلول‌ها است. این روش به‌ویژه در تحقیقات بیولوژی سلولی و سم‌شناسی مورد استفاده قرار می‌گیرد. در زیر مراحل و اصول این روش توضیح داده شده است:

اصول روش MTT:

اصل MTT چیست؟

    اصل MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) یک ترکیب زرد رنگ است که به عنوان یک ماده رنگی در آزمایشات بیولوژیکی استفاده می‌شود. این ترکیب توسط آنزیم‌های میتوکندری سلول‌های زنده به فرم مایع آبی رنگ (formazan) تبدیل می‌شود.

 فرآیند تبدیل:

   سلول‌های زنده دارای فعالیت میتوکندری هستند و می‌توانند MTT را به formazan تبدیل کنند. این فرآیند نشان‌دهنده زنده‌مانی سلول‌ها است. در صورتی که سلول‌ها آسیب دیده یا مرده باشند، این تبدیل انجام نمی‌شود.

مراحل انجام آزمایش:

 کشت سلولی:

    سلول‌ها در یک محیط کشت مناسب کشت داده می‌شوند و سپس تحت تأثیر مواد شیمیایی یا داروها قرار می‌گیرند.

اضافه کردن MTT:

    پس از زمان مشخصی، محلول MTT به محیط کشت اضافه می‌شود. سلول‌ها به مدت معین (معمولاً چند ساعت) در دمای 37 درجه سانتی‌گراد نگهداری می‌شوند تا MTT به formazan تبدیل شود.

حل کردن formazan:

   پس از اتمام زمان، محلول حلال (معمولاً DMSO یا ایزوپروپانول) به محیط اضافه می‌شود تا بلورهای formazan حل شوند.

 اندازه‌گیری جذب نوری:

    مقدار جذب نوری محلول با استفاده از اسپکتروفتومتر در طول موج مناسب (معمولاً 570 نانومتر) اندازه‌گیری می‌شود. میزان جذب نوری با تعداد سلول‌های زنده مرتبط است.

تحلیل نتایج:

 محاسبه درصد زنده‌مانی: 

    با مقایسه جذب نوری نمونه‌های تحت تأثیر ماده سمی با نمونه کنترل (بدون ماده سمی)، می‌توان درصد زنده‌مانی سلول‌ها را محاسبه کرد.

تعیین دوز موثر: 

    با استفاده از داده‌های حاصل از آزمایش، می‌توان دوز موثر (EC50) مواد سمی را تعیین کرد.

مزایا و معایب:

مزایا:

 حساسیت بالا و قابلیت شناسایی زنده‌مانی سلول‌ها.

 سریع و ساده بودن روش.

معایب:

 عدم تمایز بین نوع مرگ سلولی (آپوپتوز یا نکروز).

نیاز به شرایط خاص برای کشت سلولی و دقت در انجام آزمایش.

به طور کلی، روش MTT ابزاری مفید برای ارزیابی سمیت سلولی و مطالعه اثرات مواد مختلف بر روی سلول‌ها است.
مدرس: دکتر خلیل حاجی اصغرزاده 
هیئت علمی دانشگاه علوم پزشکی تبریز 

زمان: ۳۰ فروردین، ساعت ۲۰ الی ۲۲

 همراه با گواهی معتبر انگلیسی

 پشتیبانی و دسترسی مادام العمر

سرفصل‌ها

 مقدمه ای بر روش MTT

 مزایا، معایب و کاربردهای این روش

 مراحل انجام کار

 تفسیر داده ها
 

هزینه: با احترام، ۱۳۹ هزار تومان

ثبت نام: آیدی تلگرامی
@cmbadmin